Nou kit de detecció d'àcids nucleics de coronavirus (SARS-Cov-2).

New Cornavirus(SARS-Cov-2) Nucleic Acid Detection Kit

(Flumineralscent RT-PCR Probe Method) Product Manual

【Product name 】Nou kit de detecció d'àcids nucleics de coronavirus (SARS-Cov-2) (mètode de sonda RT-PCR fluorescent)

【Packaging specifications 】25 proves/Kit

【Intended usedat】

Aquest kit s'utilitza per a la detecció qualitativa d'àcid nucleic del nou coronavirus en hisops nasofaríngs, hisops orofaríngs (gola), hisops nasals anteriors, hisops de cornet mitjà, rentats nasals i aspirats nasals de persones sospitoses de COVID19 pel seu proveïdor d'atenció mèdica. La detecció dels gens ORF1ab i N del nou coronavirus es pot utilitzar per al diagnòstic auxiliar i el seguiment epidemiològic de la nova infecció per coronavirus.

【Principles of the procedure 】

Aquest kit està dissenyat per a sondes TaqMan específiques i cebadors específics dissenyats per al nou coronavirus (SARS-Cov-2) ORF1ab i seqüències del gen N. La solució de reacció de PCR conté 3 conjunts d'encebadors específics i sondes fluorescents per a la detecció específica d'objectius, i un conjunt addicional d'encebadors específics i sondes fluorescents s'utilitza com a control estàndard intern del kit per detectar gens endògens de neteja.

El principi de prova és que la sonda fluorescent específica es digereix i es degrada per l'activitat exonucleasa de l'enzim Taq en la reacció de PCR, de manera que el grup fluorescent reporter i el grup fluorescent apagat es separen, de manera que el sistema de control de fluorescència pugui rebre un fluorescent. senyal i, a continuació, mitjançant l'efecte d'enriquiment de l'amplificació per PCR, el senyal de fluorescència de la sonda assoleix un valor de llindar establert: valor Ct (llindar de cicle). En el cas que no hi hagi amplicó objectiu, el grup informador de la sonda està a prop del grup d'extinció. En aquest moment, es produeix la transferència d'energia de ressonància de fluorescència i la fluorescència del grup reporter s'apaga pel grup d'extinció, de manera que el senyal fluorescent no es pot detectar amb l'instrument de PCR fluorescent.

Per controlar l'ús de reactius durant la prova, el kit està equipat amb controls positius i negatius: el control positiu conté el plasmidi recombinant del lloc objectiu i el control negatiu és l'aigua destil·lada, que s'utilitza per controlar la contaminació ambiental. Es recomana establir un control positiu i un control negatiu simultàniament durant la prova.

【Main components 】

Nota：(1) Els components dels diferents kits de lots no es poden barrejar ni intercanviar.

(2) Prepara el teu propi reactiu: Kit d'extracció d'àcids nucleics.

【Storage conditons i expiration date 】

For BST-SARS-25:Transportar i emmagatzemar a -20 ± 5 ℃ durant molt de temps.

For BST-SARS-DR-25:Transport a temperatura ambient. Emmagatzemar a -20 ± 5 ℃ durant molt de temps.

Eviteu cicles de congelació-descongelació repetits. El període de validesa s'estableix provisionalment per a 12 mesos.

Consulteu l'etiqueta per a la data de fabricació i ús.

Després de la primera obertura, el reactiu es pot emmagatzemar a -20 ± 5 ° C durant no més d'1 mes o fins al final del període de reactiu, la data que passi primer, per evitar cicles de congelació-descongelació repetits i el nombre de congelació del reactiu. -Els cicles de descongelació no han de superar les 6 vegades.

【Applicable instrument】ABI 7500, SLAN-96P, Roche-LightCycler-480.

【Sample requirements 】

1.Tipus de mostra aplicable: solució d'àcid nucleic extreta.

2. Emmagatzematge i transport de mostres: emmagatzemar a -20 ± 5 ℃ durant 6 mesos. Congelar i descongelar les mostres no més de 6 vegades.

【Testing method】

1.Nucleic acid extraction

Seleccioneu un kit d'extracció d'àcid nucleic adequat per extreure l'àcid nucleic viral i seguiu les instruccions del kit corresponent. Es recomana utilitzar un kit d'extracció i purificació d'àcid nucleic produït per Yixin Bio-Tech (Guangzhou) Co., Ltd. o un kit de purificació d'àcid nucleic equivalent.

2.  Reaction reatgent preparation

2.1 For BST-SARS-25:

(1) Traieu la barreja SARS-Cov-2 i la barreja d'enzims, es fongui completament a temperatura ambient amb el dispositiu Vortex i, a continuació, centrifugueu breument.

(2) Es va afegir 16,5 uL de barreja d'enzims a 358,5 uL de barreja SARS-Cov-2 i es va barrejar bé per obtenir la solució de reacció mixta.

(3) Prepareu un tub octal de PCR net de 0,2 ml i marqueu-lo amb 15 uL de la solució de reacció mixta anterior per pou.

(4) Afegiu 15 μL de solució d'àcid nucleic purificat, el control positiu i el control negatiu, i cobreixi amb cura la tapa del tub octal.

(5) Barregeu bé invertint cap per avall i centrifugueu ràpidament per concentrar el líquid al fons del tub.

1